Question

【題目】利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A.第四輪循環(huán)產(chǎn)物中PCR方法擴(kuò)增出的目的基因片段只有8個(gè)

B.設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連

C.退火溫度過(guò)高可能導(dǎo)致PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物

D.第四輪循環(huán)產(chǎn)物中同時(shí)含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率為15/16

Answer 1

【答案】D

【解析】

PCR全稱為多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。PCR的原理為DNA復(fù)制，需要在一定的緩沖液中進(jìn)行，所需的條件為模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR的反應(yīng)過(guò)程：變性、復(fù)性、延伸。PCR產(chǎn)物以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即一個(gè)DNA分子經(jīng)n次擴(kuò)增，產(chǎn)物總量為2n。

A、根據(jù)DNA半保留復(fù)制的特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)第一、二輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子兩條鏈長(zhǎng)度均不相等，第三輪循環(huán)后產(chǎn)生的DNA中有2個(gè)為兩條鏈等長(zhǎng)的目的基因片段，則第四輪循環(huán)產(chǎn)物中有8個(gè)兩條鏈等長(zhǎng)的目的基因片段，A正確；

B、設(shè)計(jì)引物時(shí)，需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連，影響引物與目的基因單鏈的結(jié)合，B正確；

C、退火的目的是使兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條DNA單鏈結(jié)合，而高溫條件下DNA雙鏈會(huì)分開(kāi)，因此退火溫度過(guò)高可能引起兩種引物不能與兩條DNA單鏈結(jié)合，進(jìn)而導(dǎo)致PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，C正確；

D、DNA復(fù)制為半保留復(fù)制，第四輪循環(huán)即DNA復(fù)制4次，共形成24＝16個(gè)DNA分子，其中含有最初模板鏈的2個(gè)DNA分子含有引物A或引物B，其余14個(gè)DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四輪循環(huán)產(chǎn)物中同時(shí)含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率為14/16＝7/8，D錯(cuò)誤。

故選D。