Question

【題目】我國曾經發生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經研究發現，該病是由SARS病毒(一種RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如圖：

(1)實驗步驟①所代表的反應過程是______________________。

(2)步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制酶和________酶，后者的作用是將用限制性核酸內切酶切割的S蛋白基因和________________連接起來。

(3)如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________________，也不能________________。

(4)為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用_________________與SARS康復病人血清進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結論。

(5)步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是______________________。

Answer 1

【答案】（1）逆轉錄 （2）DNA連接 載體 S基因（3）復制 合成S基因的mRNA（4）大腸桿菌中表達的S蛋白 SARS康復病人血清（5）相同 表達蛋白質所用的基因相同

【解析】試題分析：⑴據圖可知，過程①是以RNA為模板合成DNA的過程，即是逆轉錄。⑵基因表達載體的構建需要使用限制酶和DNA連接酶；DNA連接酶的作用是將目的基因和運載體連接在一起。⑶若把S基因直接導入大腸桿菌，S基因很難把自己整合到細菌的DNA上，這樣的S基因是無法復制和轉錄的；要想檢驗大腸桿菌中表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同作用，必須要獲得病毒S蛋白，根據免疫知識，SARS康復病人血清應該含有該物質。⑷檢測蛋白質的方法是抗原抗體雜交，即將大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清（含有抗S蛋白的抗體）結合。⑸由于基因相同，因此所表達的蛋白質中氨基酸序列也應相同。