Question

【題目】下表為幾種限制酶識別的序列和切割的位點。如下圖，已知某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位點。現用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割該DNA片段（假設所用的酶均可將識別位點完全切開），下列各種酶切位點情況中，可以防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環狀的是（　　）

限制酶	BamH Ⅰ	EcoR Ⅰ	PstⅠ
識別序列和 切割位點

A. 1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ

B. 1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ

C. 1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ

D. 1為EcoRⅠ， 2為PstⅠ， 3為PstⅠ，4為BamHⅠ

Answer 1

【答案】C

【解析】

基因工程的工具：限制酶、DNA連接酶、運載體。

若1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割后，目的基因兩端的黏性末端是EcoRⅠ產生的，可以發生自身環化，A錯誤；若1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割后，目的基因兩端均為EcoRⅠ切割的黏性末端，會發生自身環化，B錯誤；1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割后，目的基因兩端的序列為用PstⅠ和EcoRⅠ切割后產生的不同的黏性末端，C正確；1為EcoRⅠ， 2為PstⅠ， 3為PstⅠ，4為BamHⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割后，目的基因兩端均為PstⅠ切割的黏性末端，會發生自身環化，D錯誤。故選C。