Question

【題目】下圖為轉基因抗病香蕉的培育過程圖，其中質粒上的PstI、SmaI、EcoRI、ApaI 等四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請據圖回答下列問題：

限制酶	Apa I	EcoR I	Pst I	Sma I
識別序列和切割位點

（1）形成重組質粒A時，應選用限制酶__________對質粒和含有抗病基因的DNA 進行切割。

（2）一個質粒被限制酶EcoRI、PstI、SmaI 同時切割后，可得到的DNA片段的數目和黏性末端的數目分別是__________。

（3）圖中①②所用的培養基應考慮植物激素的__________。（寫出2 個即可）

（4）在轉基因抗病香蕉培育過程中涉及到的生物工程技術有__________。（寫出2個即可）

Answer 1

【答案】PstI和EcoRI 3、4 種類、含量和比例 體外DNA重組技術、轉基因技術、植物組織培養技術等

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細胞中穩定高效地表達。為了實現基因工程的目標，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素，并按照一定的程序進行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導入受體細胞也稱（宿主）細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。

（1）目的基因上有EcoRI、PstI、SmaI三個酶切位點，SmaI會破壞目的基因，因此形成重組質粒A時，應選用限制酶PstI和EcoRI對質粒和含有抗病基因的DNA 進行切割。

（2）一個質粒被限制酶EcoRI、PstI、SmaI 同時切割后，有三個酶切位點，可得到的DNA片段的數目是3，黏性末端的數目是4，SmaI切割后是平末端。

（3）圖中①②是脫分化和再分化的過程，所用的培養基應考慮植物激素的種類、含量和比例，以適應不同階段的需要。

（4）在轉基因抗病香蕉培育過程中涉及到的生物工程技術有體外DNA重組技術、轉基因技術、植物組織培養技術等。