Question

【題目】某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題。

（1）接種前需要對培養基及培養皿等進行滅菌，常用的滅菌方法是____________。培養基滅菌后，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0．1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為51、50和49。據此可得出每升水樣中的活菌數為_________ 。

（2）實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是____________。

（3）培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量________的培養液，接入新的培養液中連續培養，使“目的菌”的數量________。

（4）轉為固體培養時，為獲得單菌落進行繼續篩選，常采用______________或____________法，接種后，應將培養皿________(填“正放”或“倒置”)

（5）實驗結束時，使用過的培養基應該進行________處理后，才能倒掉。

（6）微生物的鑒定：為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的____________(填“選擇”或“鑒別”)培養基中加入_____________指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變___________色。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 5．0×108 異養需氧型 減少 增加 平板劃線法 稀釋涂布平板 倒置 滅菌 選擇 酚紅 紅

【解析】

（1）實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。
（2）常用的接種方法有①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）接種前需要對培養基及培養皿等進行滅菌，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；培養基滅菌后，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為51、50和49，據此可得出每升水樣（1L=1000mL）中的活菌數=（51+50+49）/3×1000×10×1000=5.0×108。

（2）實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是異養需氧型。

（3）由于“目的菌”有降解有機化合物A的作用，所以培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量減少的培養基；再接入新的培養液中連續培養，使“目的菌”的數量進一步增加。

（4）轉為固體培養時，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行接種，分離獲得單菌落；接種到固體培養基后，應將培養皿倒置培養。

（5）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養基上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。

（6）微生物的鑒定：為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色。