Question

【題目】研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，進行了相關實驗。回答下列問題：

（1）獲取菌種:在某熱電廠煙囪周圍區域采集土樣，取樣用的小鐵鏟和盛裝土樣的信封在使用前都需要___________。為了獲得目的菌種，應該將采集的土樣進行___________處理后，然后接種到培養基上進行培養，培養基中的營養物質一般包括___________、水和無機鹽。

（2）分離目的菌:將目的菌轉移到含少量無菌水的錐形瓶中，邊攪拌邊持續通入S02氣體，馴化幾分鐘后接種到固體培養基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通S02的時間，與此同時逐步降低培養基的pH。由此分離得到的脫硫細菌具有較強的___________和___________的能力。

（3）活菌計數:為獲得大量的目的菌用于生產，在培養過程中技術人員需連續取樣進行計數。稀釋涂布平板法常用來統計樣品中的活菌數目，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的___________，因此，統計平板上的菌落數即可推測出樣品中含有的活菌數目。通常情況下，用此計數方法統計的菌落數往往 比活菌的實際數目___________（高/低），這是因為__________________。

（4）檢測脫硫細菌對抗生素的敏感性:取該單菌落適當 稀釋后的液體2滴，接種于固體培養基表面，并用___________使菌液均勻分布。在37℃培養箱中培養24小時后，將大小相同且分別含有三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板的不同位置，再培養一段時間后，結果如下圖（濾紙片周圍的白色區域表示沒有菌落分布），據此實驗結果推測，三種抗生素中對該菌抑制作用最強的是___________。

Answer 1

【答案】 滅菌 稀釋 碳源、氮源 利用SO2 耐酸 一個活菌 低 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 涂布器 青霉素

【解析】試題分析：在培養基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）取樣用的小鐵鏟和信封在使用前需要進行滅菌處理。為了獲得目的菌種，應該將采集的土樣進行稀釋處理后，然后接種到培養基上進行培養。培養基中的營養物質一般包括碳源、氮源、水和無機鹽。

（2）根據馴化過程可知，馴化過程中不斷通入SO2，并且延長時間，與此同時逐步降低培養基的pH，因此分離獲得具有耐受SO2和適應酸性環境能力的煙氣脫硫細菌。

（3）稀釋涂布平板法計數時，培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。用稀釋涂布平板法進行微生物計數時，由于所產生的菌落可能是由兩個或多個細胞形成的，所以統計的菌落數往往比活菌的實際數目偏低。

（4）稀釋涂布平板法中，可以用涂布器使菌液均勻分布。據圖分析，青霉素周圍的白色區域最大，說明青霉素對該菌抑制作用最強。