Question

【題目】營養缺陷型菌株就是在人工誘變或自發突變后，微生物細胞代謝調節機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業生產提供大量的原料產物。以下是實驗人員利用影印法初 檢氨基酸缺陷型菌株的過程。請回答下列問題：

（1）過程①的接種方法為__________________________________________。

（2）進行②過程培養時，應先將絲絨布轉印至基本培養基上，原因是_____。釆用影 印法培養的優點是_________。

（3）為了進一步完成對初檢的營養缺陷型菌株的鑒定，實驗人員進行了如下操作：

①用接種針挑取_______（選填“菌落 A”或“菌落 B”）接種于盛有完全培養液的離心管中， 28℃振蕩培養 12 天后，離心，取沉淀物用______洗滌3次，并制成菌懸液。

②吸取 lmL 菌懸液加入無菌培養皿中，傾注 15mL 融化并冷卻至 4550℃的基本培養基，待 其冷凝后用記號筆在皿底劃分五個區域，標記為 A、B、C、D、E。

③在劃分的五個區域上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經培養后，觀察生長圈出 現的區域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。

在上述鑒定實驗中，發現在培養基 A、D區域出現生長圈，說明該營養缺陷型菌株屬于_____________________

Answer 1

【答案】 稀釋涂布平板法 防止將特定營養成分帶入培養基 同種菌株的接種位置相同 菌落 A 無菌水 天冬氨酸缺陷型

【解析】試題分析：本題考查微生物的培養、分離，考查對微生物接種、培養方法的理解。解答此題，可根據基本培養基和完全培養基上菌落的不同挑選缺陷型菌株。

（1）經過過程①，培養皿上菌落較為均勻的分布，接種方法應為稀釋涂布平板法。

（2）進行②過程培養時，先將絲絨布轉印至基本培養基上，后轉印至完全培養基上，而不是反過來操作，目的是防止將完全培養基中特定營養成分帶入基本培養基。釆用影印法培養，同種菌株的接種位置相同，可在完全培養基上找出基本培養基不能生存的缺陷菌株。

（3）據圖可知，菌落A在基礎培養基上不能生長，為營養缺陷型菌株。進一步完成對初檢的營養缺陷型菌株的鑒定，可用接種針挑取菌落 A接種于盛有完全培養液的離心管中， 28℃振蕩培養 12 天后，離心，取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。培養基 A、D區域共有的氨基酸是天冬氨酸，在A、D區域出現生長圈，說明該營養缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型。