Question

【題目】下圖是利用基因工程技術生產可食用疫苗的部分過程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性核酸內切酶。下列有關說法正確的是

A. 構建基因表達載體需要用到EcoRⅠ、PstⅠ兩種限制酶

B. 若用圖中四種限制酶同時切割質粒，可以產生四個DNA片段

C. 表達載體中除圖示標注的結構外還應有啟動子和終止子等調控因子

D. 篩選含重組質粒的受體細胞時應在培養基中加入卡那霉素抗性基因

Answer 1

【答案】ABC

【解析】

質粒上和含抗原基因的DNA中含有的限制酶的酶切位點相同。SmaⅠ的識別位點位于抗原基因中，PstⅠ、EcoRⅠ的識別位點分別位于抗原基因的兩端；選擇PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA不會破壞抗原基因的結構。質粒上的卡那霉素抗性基因為標記基因，可供重組DNA的鑒定和選擇。

題圖顯示：抗原基因中存在SmaⅠ的識別位點，使用SmaⅠ切割含抗原基因的DNA會破壞抗原基因的結構，抗原基因的兩端分別含有PstⅠ、EcoRⅠ的識別位點，用PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA，能保持抗原基因結構的完整性，所以構建基因表達載體需要用到EcoRⅠ、PstⅠ兩種限制酶，A正確；質粒是一種很小的雙鏈環狀DNA分子，若用圖中四種限制酶同時切割質粒，可以產生四個DNA片段，B正確；表達載體中除圖示標注的結構（目的基因、標記基因）外還應有啟動子和終止子等調控因子，C正確；篩選含重組質粒的受體細胞時應在培養基中加入卡那霉素，D錯誤。