Question

【題目】科學工作者欲培育能產生含鐵量較高的轉基因花生新品種，Ti質粒中含有潮霉素抗性基因，具體步驟如圖：

（1）完整的Ti質粒除了圖示結構外，還應該包括啟動子、終止子等，其中啟動子位于基因的首段，它的作用是_____________________________________________________________________。

（2）若鐵結合蛋白基因來自菜豆，獲取該目的基因需要用到的工具酶的特點是_______________________________________________________________________________________。

（3）圖中將目的基因（鐵結合蛋白基因）導入受體細胞的方法為______________；為確定轉基因花生是否培育成功，首先應檢測___________，這是目的基因能否在受體細胞內穩定遺傳的關鍵；其次，利用___________檢測目的基因是否轉錄出相應的mRNA；最后，利用抗原—抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。

（4）圖中用到的植物細胞工程技術是_______________________________，培養基1中經過脫分化得到愈傷組織，培養基2中篩選的方法是在培養基中加入一定量的_________________，培養基3的作用是______________________________。

Answer 1

【答案】RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因的轉錄 能識別雙鏈DNA分子的某種特定的脫氧核苷酸序列并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 農桿菌轉化法 轉基因花生的DNA上是否插入目的基因 分子雜交法 植物組織培養 潮霉素 誘導愈傷組織再分化

【解析】

據圖分析，重組Ti質粒中鐵結合蛋白基因稱為目的基因，潮霉素抗性基因為標記基因；將重組Ti質粒導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法；將開花后未成熟的胚進行植物組織培養，脫分化形成愈傷組織，作為受體細胞，最終培育形成轉基因花生，過程中需要生長素和細胞分裂素進行調節。

基因工程的一般操作步驟有：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達。獲取目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲�、诶�用PCR技術擴增③人工合成（化學合成）。

（1）啟動子位于基因的首段，它是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因的轉錄。

（2）若鐵結合蛋白基因來自菜豆，獲取該目的基因需要用到的工具酶是限制酶，限制酶能識別雙鏈DNA分子的某種特定的脫氧核苷酸序列并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

（3）圖中將目的基因（鐵結合蛋白基因）導入受體細胞的方法為農桿菌轉化法；為確定轉基因花生是否培育成功，首先應檢測轉基因花生的DNA上是否插入目的基因；其次，利用分子雜交法檢測目的基因是否轉錄出相應的mRNA；最后，利用抗原—抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。

（4）圖中用到的植物細胞工程技術是植物組織培養；培養基1中經過脫分化得到愈傷組織，培養基2中篩選的方法是在培養基中加入一定量的潮霉素，培養基3的作用是誘導愈傷組織再分化。