Question

【題目】回答與微生物實驗室培養有關的問題：

（1）在制備固體培養基時需加入的凝固劑，常用的是___________。

（2）為防止外來雜菌入侵，對__________等可采用干熱滅菌法進行滅菌。

（3）如圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個操作過程中，對接種環至少需進行________次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋，將平板_____放入恒溫箱中培養，這樣放置的目的是______。

（4）為統計培養液中細菌的數目，稀釋后滴于培養基表面，用涂布器涂勻，這種接種方法稱為_____。用該方法統計樣本菌落數時需要設計對照組，其目的是______________________。

（5）篩選能分解纖維素的細菌時，應在以纖維素為唯一碳源的培養基中加入_____________。

Answer 1

【答案】】瓊脂 玻璃器皿和金屬用具 6 倒置 避免培養基被污染和防止培養基水分過快揮發 稀釋涂布平板法 判斷培養基是否被雜菌污染（或“培養基滅菌是否合格”） 剛果紅

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

2、實驗室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min。

（1）制備固體培養基最常用的凝固劑是瓊脂。

（2）為防止外來菌入侵，需要進行消毒滅菌，對耐高溫的需要保持干燥的物品如玻璃器皿和金屬用具等，可采用干熱滅菌法進行滅菌。

（3）平板劃線接種過程中需在接種前、每次劃線后對接種環進行灼燒滅菌，圖中共接種5個區域，故接種環至少需要進行6次灼燒滅菌處理。微生物培養過程中，易產生冷凝水，為防止水珠滴在培養基表面造成污染，培養時需將平板倒置。

（4）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。用該方法統計樣本菌落數時需要設計對照組，在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養一段時間，其目的是檢測培養基平板滅菌是否合格。

（5）剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。