Question

【題目】生物興趣小組以甜菜嫩葉為材料提取DNA，主要實驗步驟如下，其中氯仿-異戊醇不溶于水，且密度均大于水。請分析回答：

（1）圖1以甜菜嫩葉為材料，每毫克組織所提取的DNA量較高，原因是_____________。

（2）圖1步驟①中甜菜組織研磨前先經(jīng)液氮冷凍處理的主要優(yōu)點是_________________。在常溫條件下，也可向切碎的組織材料中加入一定量的____________________，再進行充分攪拌和研磨。

（3）圖1步驟③將DNA粗提液在65℃水浴保溫60min的目的是___________________。步驟④加氯仿-異戊醇，離心后取上清液的原理是_______________________________。

（4）根據(jù)圖1操作步驟可知，影響DNA純度的物質(zhì)主要有____________________和小分子物質(zhì)等。

（5）電泳可以直觀對比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝膠上遷移速率不同，從而產(chǎn)生不同的條帶。圖2是利用三種不同的方法提取到的甜菜嫩葉總DNA凝膠電泳結(jié)果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。實驗結(jié)果顯示A、B方法提取的總DNA電泳結(jié)果只有一條帶，而C方法有明顯的“拖尾”現(xiàn)象。出現(xiàn)“拖尾”現(xiàn)象的原因是________________________________________________。

Answer 1

【答案】嫩葉細胞分裂旺盛 充分破碎植物細胞，使研磨充分 洗滌劑和食鹽 使蛋白質(zhì)變性 DNA不溶于氯仿-異戊醇，蛋白質(zhì)等溶于氯仿-異戊醇 蛋白質(zhì)、RNA DNA發(fā)生斷裂或降解，形成許多大小不等的DNA片段

【解析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

2、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。

（1）圖1以甜菜嫩葉為材料，嫩葉細胞分裂旺盛，每毫克組織所提取的DNA量較高。

（2）圖1步驟①中甜菜組織研磨前先經(jīng)液氮冷凍處理的主要優(yōu)點是充分破碎植物細胞，使研磨充分。在常溫條件下，也可向切碎的組織材料中加入一定量的洗滌劑和食鹽，再進行充分攪拌和研磨。

（3）將DNA粗提液在65℃水浴保溫60min的目的是使蛋白質(zhì)變性。步驟④加氯仿-異戊醇，離心后取上清液的原理是DNA不溶于氯仿-異戊醇，蛋白質(zhì)等溶于氯仿-異戊醇。

（4）根據(jù)圖1操作步驟可知，影響DNA純度的物質(zhì)主要有蛋白質(zhì)、RNA和小分子物質(zhì)等。

（5）DNA分子在進行凝膠電泳時，由于DNA發(fā)生斷裂或降解，形成許多大小不等的DNA片段，因此會出現(xiàn)“拖尾”現(xiàn)象。