Question

【題目】抗體是一種由漿細胞分泌，可與相應抗原發生特異性結合反應的球蛋白。下列是通過生物學技術制備抗體的兩個途徑模式，請回答相關問題：

（1）與植物細胞融合相比較，途徑1中的過程①特有的誘導方式是用_______________處理，過程②需要經過兩次篩選，其最終的目的是________________。

（2）在途徑2中，將mRNA逆轉錄為cDNA再進行PCR擴增被稱為RT-PCR技術，RT-PCR過程需要的酶有___________________；利用此技術擴增X基因時，設計兩種引物的堿基序列的主要依據是_____________________；同時為了便于擴增后的X基因與質粒連接，常在兩條引物上設計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是_________________________。

（3）1991年，英國科學家將人的α1-抗胰蛋白酶基因導入綿羊受精卵中，成功從其中4只轉基因母綿羊的乳汁中獲得了藥用的α1-抗胰蛋白酶。這些藥物蛋白質的活性比上述轉基因工程菌生產的蛋白質高且穩定，原因是：______________________________。

Answer 1

【答案】滅活的病毒 篩選出能產生所需特異性抗體的雜交瘤細胞 逆轉錄酶和Taq酶 X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列 使X基因能定向插入表達載體，減少自連 與細菌相比，哺乳動物的乳腺細胞含有內質網和高爾基體等細胞器，可對分泌蛋白質進行修飾、加工

【解析】

據圖分析，圖示為制備單克隆抗體的兩個過程，其中①表示動物細胞融合，即骨髓瘤細胞與細胞A（已經免疫的B淋巴細胞或漿細胞）融合的過程，形成的Y細胞是雜交瘤細胞；②表示動物細胞培養和篩選的過程；③表示從漿細胞中提取mRNA的過程；④表示逆轉錄形成X基因（控制抗體合成的基因）的過程；⑤構建基因表達載體（結構甲）的過程，⑥表示將基因表達載體導入受體細胞的過程。

（1）途徑1中的過程①表示動物細胞融合，與植物細胞融合相比，其特有的誘導方式是用滅活的病毒處理；過程②需要經過兩次篩選，最終得到的是能產生所需特異性抗體的雜交瘤細胞。

（2）通過逆轉錄獲得cDNA的過程需要逆轉錄酶的催化；在利用PCR技術擴增cDNA的過程中，需要用到耐高溫的DNA聚合酶，即Taq酶；利用PCR技術擴增X基因時，設計兩種引物的堿基序列的主要依據是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列；為了便于擴增后的X基因與質粒連接，常在兩條引物上設計加入不同的限制酶酶切位點，進而使X基因能定向插入表達載體，并減少自連。

（3）與細菌相比，哺乳動物的乳腺細胞含有內質網和高爾基體等細胞器，可對分泌蛋白質進行修飾、加工，所以利用綿羊受精卵為受體細胞獲得的藥物蛋白質的活性比上述轉基因工程菌生產的蛋白質高且穩定。