Question

【題目】下圖是培育抗除草劑玉米的技術路線圖，含有內含子的報告基因只能在真核生物中正確表達，其產物能催化無色物質K呈現藍色。轉化過程中愈傷組織表面常殘留農桿菌，會導致未轉化的愈傷組織可能在含除草劑的培養基中生長。下列相關敘述不正確的是（ ）

A. 過程①用兩種限制酶就可防止酶切產物自身環化

B. 過程②用Na+處理可提高轉化成功率

C. 過程③應在培養基中加入除草劑和物質K

D. 篩選得到的A是無農桿菌附著的轉化愈傷組織

Answer 1

【答案】B

【解析】過程①為基因表達載體的構建，為了防止酶切產物自身環化，可用兩種限制酶切割目的基因的兩端和質粒，A正確；過程②是將構建的基因表達載體導入農桿菌體內，用Ca2+處理可提高轉化成功率，B錯誤；農桿菌屬于原核生物，含有內含子的報告基因只能在真核生物中正確表達，其產物能催化無色物質K呈現藍色，過程③的目的是篩選出成功導入除草劑抗性基因G的愈傷組織（即篩選轉化的愈傷組織），表面殘留有農桿菌的未轉化愈傷組織和成功轉化的愈傷組織都含有除草劑抗性基因G，都能在含除草劑的培養基中生長，但表面殘留的農桿菌體內的報告基因不能表達，不會出現藍色，而成功轉化的愈傷組織細胞內含有的報告基因則能正確表達，進而出現藍色，所以篩選轉化的愈傷組織，其培養基中應加入除草劑和物質K，最終篩選得到的A是無農桿菌附著的轉化愈傷組織，C、D正確。