Question

【題目】白細胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細胞介素的基因導入到酵母菌細胞中，使其分泌出有活性的白細胞介素。

（1）為增加白細胞介素基因的數量，可使用___________________技術，但前提是必須知道該基因的部

分核苷酸序列，以便根據這一序列合成_________________。

（2）為便于鑒別受體細胞中是否含有外源基因，攜帶外源基因的質粒上應有___________，還應有____________________，以利于外源基因的表達。

（3）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用_____________處理酵母菌細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內，并且在其細胞內維持穩定和表達的過程，稱為_________。在表達過程中，啟動子需與____________________識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（4）為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母菌細胞作為受體細胞，可能原因是_____________________。

Answer 1

【答案】 PCR 設計引物 標記基因 啟動子和終止子 Ca2+ 轉化 RNA聚合酶 細菌細胞中無內質網和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器

【解析】試題分析：分析題圖，圖示表示基因表達載體的構建過程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。

（1）基因工程中，常用PCR技術擴增目的基因，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設計引物。

（2）基因表達載體上的標記基因可以用于是否導入目的基因的檢測；此外還應該有啟動子和終止子，以便外源基因的表達。

（3）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用Ca2+處理酵母菌，使酵母菌稱為感受態細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內，并且在其細胞內維持穩定和表達的過程，稱為轉化。在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（4）由于細菌屬于原核生物，細胞中無內質網和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器，因此為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而應該使用酵母細胞作為受體細胞。