Question

【題目】為了研究不同“層次”血清對細胞增殖的影響，科研人員做了以下實驗：將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時間。取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標記為上、中、下，再分別從三個瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均勻備用。分別取等量的不同“層次”的血清和混合血清加入到新配制的動物細胞培養液中，再接種小鼠上皮細胞（接種細胞密度為5×104個/mL），在適宜條件下培養72 h后，進行計數，結果如下表。請回答：

組別	上	中	下	混
72h細胞數/個mL-1	9.75×104	1.04×105	7.5×104	1.85×105

（1）細胞培養過程中，CO2的主要作用是____________，每天更換培養基的目的是____________。

（2）培養液中加入動物血清的作用是____________，還加入一定量抗生素的目的是____________。

（3）如果用血細胞計數板計數細胞時進行如圖所示的操作，統計出來的數據比實際值偏____________。正確的操作方法應該是____________。

（4）從表中結果可以看出，不同“層次”的血清對細胞增殖的影響不同。造成這種結果的主要原因是不同“層次”血清中____________。

（5）根據實驗結果，在動物細胞培養過程中，正確使用血清的方法是____________。

Answer 1

【答案】維持培養液的pH 補充營養物質，去除代謝廢物，利于細胞增殖 補充細胞生長所需的未知物質 防止雜菌污染 高 先蓋上蓋玻片，后滴細胞懸液 成分不同 將血清充分混勻后加入到培養液中

【解析】

分析表格：表中為上、中、下三層血清及混合血清中細胞增殖情況，不同“層次”的血清對細胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，因此在動物細胞培養過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加入到培養液中。

（1）動物細胞培養需要一定的氣體環境，即95%空氣+5%二氧化碳，其中二氧化碳的主要作用是維持培養液的pH；每天更換培養基可以補充營養物質，并能去除代謝廢物，這樣有利于細胞增殖。

（2）培養液中加入動物血清的作用是補充細胞生長所需的未知物質，還加入一定量抗生素的目的是防止雜菌污染。

（3）如果用血細胞計數板計數細胞時，應該先蓋上蓋玻片，后滴加細胞懸液，若先滴加細胞懸液，后蓋上蓋玻片，則統計出來的數據比實際值偏大。

（4）由表可知，不同“層次”的血清對細胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，原因主要是不同“層次”血清中營養成分不同。

（5）由表可知混合血清中細胞增殖速率最快，因此在動物細胞培養過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加入到培養液中。