Question

【題目】如圖為構建某重組質粒的過程示意圖．lacZ基因可使細菌利用加入培養基的物質X﹣gal，從而使菌落顯現出藍色，若無該基因，菌落則成白色．圖中甲﹣﹣戊DNA片段只注明了黏性末端處的堿基種類，其它堿基的種類未作注明．

（1）若酶M特異性識別的DNA堿基序列是，則酶N特異性識別的DNA堿基序列是_____。

（2）過程②是將所有片段混合在一起，用_____酶拼接可得到不同的重組DNA。

（3）如果只考慮2個片段的組合，那么甲、乙、丁三個片段中能夠形成環狀DNA的片段組合是_____。

A．甲和乙 B．甲和甲 C．甲和丁 D．乙和乙 E．乙和丁 F．丁和丁

（4）為了篩選含重組質粒的受體菌，應在通用培養基中額外加入_____，培養一段時間，挑選出_____色的菌落進一步培養．原來質粒中，限制酶M和N的酶切位點應該位于_____．

A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中

B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中

C．M和N都位于青霉素抗性基因中

D．M和N都位于lacZ基因中

（5）上述目的基因能夠在受體細菌中表達，其原因是不同生物_____。

A．共用一套DNA B．共用一套RNA C．共用一套蛋白質 D．共用一套密碼子

Answer 1

【答案】 DNA連接酶 ABCDEF 青霉素和X﹣gal 白 D D

【解析】

切割DNA的工具是限制性核酸內切酶，又稱限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列；將DNA片段拼接成新的DNA分子用的酶是DNA連接酶；質粒經過酶M和酶N的切割形成甲、乙片段，根據甲、乙片段的黏性末端可知，酶M特異性識別的DNA堿基序列是，則酶N特異性識別的DNA堿基序列是。

（1）由以上分析可知，酶N特異性識別的DNA堿基序列是。

（2）DNA連接酶可以將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來。

（3）甲、乙、丁都有兩個黏性末端，且都相同，因此如果只考慮2個片段的組合，那么甲、乙、丁三個片段中任意兩個連接都能夠連接形成環狀DNA。

（4）為了篩選含重組質粒的受體菌，應在通用培養基中額外加入青霉素和X﹣gal，培養一段時間，挑選出白色的菌落進一步培養．這表明青霉素抗性基因沒有被破壞，lacZ基因已經被破壞，因此在原來質粒中，限制酶M和N的酶切位點都位于lacZ基因中。

（5）上述目的基因能夠在受體細菌中表達，其原因是不同生物共用一套密碼子。