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【題目】脫落酸(ABA)有“逆境激素”之稱,在植物對(duì)抗干旱等不利環(huán)境因素時(shí)起重要作用。

(1)ABA對(duì)植物的生命活動(dòng)起______作用,其合成經(jīng)過(guò)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng)過(guò)程,需要NCED1~NCED5等酶的______作用。

(2)研究人員對(duì)水稻進(jìn)行干旱脅迫4h及復(fù)水4h處理,測(cè)定葉片中ABA含量及相關(guān)基因的mRNA含量,結(jié)果如圖1。

①由圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量______,誘導(dǎo)葉片氣孔______,減少水分散失。

②NCED1~NCED5基因的表達(dá)具有組織特異性,如NCED4基因主要在根中表達(dá)。

僅根據(jù)圖1的結(jié)果,能否確認(rèn)NCED4基因不是干旱脅迫的響應(yīng)基因。請(qǐng)做出判斷并說(shuō)明理由:______

(3)研究人員將NCED3基因作為目的基因,正向連接構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入水稻細(xì)胞,獲得轉(zhuǎn)基因幼苗Ⅰ,反向連接構(gòu)建表達(dá)載體(轉(zhuǎn)錄NCED3基因的非模板鏈),獲得轉(zhuǎn)基因水稻幼苗Ⅱ。將兩種幼苗與野生型水稻幼苗一起培養(yǎng),干旱脅迫處理15天后,檢測(cè)植株相關(guān)生長(zhǎng)指標(biāo)及體內(nèi)ABA含量,部分結(jié)果如下表和圖2。

水稻

幼苗

處理

每株地上部分

干重(g)

每株根干重(g)

野生型

正常灌溉

0.50

0.12

干旱脅迫

0.41

0.20

①據(jù)表中結(jié)果闡述干旱脅迫下野生型植株形態(tài)改變的生物學(xué)意義:______

②圖2中1、2、3組ABA含量無(wú)明顯差異的原因是______。

③綜合上述研究,分析第6組植株ABA含量低于第4組的原因是______。

(4)干旱脅迫下,野生型植株和NCED3基因敲除突變體中NGA1蛋白含量均增加。研究人員推測(cè)NGA1蛋白是干旱環(huán)境促進(jìn)NCED3基因表達(dá)的調(diào)控因子。檢測(cè)______植株的NCED3基因表達(dá)量,結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組,初步支持上述推測(cè)。若要進(jìn)一步驗(yàn)證推測(cè),應(yīng)選擇的實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)組處理及預(yù)期結(jié)果包括______(填選項(xiàng)前的符號(hào))。

a.NGA1基因敲除突變體 b.NCED3基因敲除突變體 c.導(dǎo)入含NGA1突變基因的表達(dá)載體 d.導(dǎo)入含NGA1基因的表達(dá)載體 e.導(dǎo)入空載體 f.正常供水環(huán)境 g.模擬干旱環(huán)境 h.NCED3-mRNA含量高于對(duì)照組 i.NCED3-mRNA含量低于對(duì)照組

【答案】調(diào)節(jié) 催化 增加 關(guān)閉 不能,NCED4基因主要在根中表達(dá),檢測(cè)的是葉片mRNA含量(或NCED基因表達(dá)具有組織特異性) 地上部分生長(zhǎng)緩慢可減少蒸騰作用,并將有機(jī)物更多地分配給地下部分;地下部分生長(zhǎng)快利于水分的吸收 干旱是促進(jìn)(啟動(dòng))NCED3基因表達(dá)的信號(hào)(正常灌溉下NCED3基因幾乎不表達(dá)) 反向連接載體的導(dǎo)入干擾了NCED3基因的表達(dá)(翻譯),NCED3的合成減少 NGA1基因敲除突變體和野生型植株 adgh

【解析】

1、植物激素是由植物體內(nèi)產(chǎn)生,并從產(chǎn)生部位運(yùn)輸?shù)阶饔貌课,?duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育具有顯著影響的微量有機(jī)物,ABA主要在植物體的根冠、萎蔫的葉片中合成。脫落酸(ABA)是一種抑制生長(zhǎng)的植物激素,因能促使葉子脫落而得名。除促使葉子脫落外尚有其他作用,如使芽進(jìn)入休眠狀態(tài)、促使馬鈴薯形成塊莖、抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、引起氣孔關(guān)閉以及調(diào)節(jié)種子胚的發(fā)育等生理作用。

2、分析圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量增加,引起氣孔關(guān)閉,降低蒸騰作用,減少水分的散失;圖1中乙圖和丙圖都是對(duì)葉片中相關(guān)基因的mRNA含量進(jìn)行的測(cè)定,根據(jù)題意NCED4基因在根細(xì)胞中表達(dá),因此根據(jù)圖1無(wú)法確認(rèn)NCED4基因與干旱脅迫的關(guān)系。

分析表中數(shù)據(jù)可知:在干旱缺水條件下,野生型植株中脫落酸抑制莖葉的生長(zhǎng),同時(shí)促進(jìn)根的生長(zhǎng),說(shuō)明脫落酸的這種作用,有利于植物適應(yīng)缺水環(huán)境。

分析圖2可知,在正常灌溉的條件下,1、2、3組中ABA含量無(wú)明顯的差異性,可能是在正常灌溉條件下NCED3基因不表達(dá);干旱脅迫下,4、56組中ABA含量均有增加,特別是轉(zhuǎn)基因水稻幼苗ⅠABA增加最多,轉(zhuǎn)基因水稻幼苗Ⅱ增加最少。

1ABA作為植物激素對(duì)植物生命活動(dòng)起到調(diào)節(jié)作用,ABA在合成過(guò)程中需要多種酶的催化作用。

2)①由圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量增加,誘導(dǎo)植物氣孔關(guān)閉,降低蒸騰作用,減少水分散失。

②根據(jù)題意,NCED1―NCED5基因的表達(dá)具有組織特異性,NCED4基因主要在根中表達(dá),而圖1的結(jié)果,檢測(cè)的是葉片mRNA含量,因此不能確認(rèn)NCED4基因不是干旱脅迫的響應(yīng)基因。

(3)①據(jù)表中結(jié)果,可以看出施加ABA后,根生長(zhǎng)加快,從土壤吸收水分增多;莖葉生長(zhǎng)減慢,植物葉片的蒸騰速率會(huì)減慢,水分散失減少,并將有機(jī)物更多地分配給地下部分以對(duì)環(huán)境的變化作出反應(yīng)。

②識(shí)圖分析可知,圖21、23ABA含量無(wú)明顯差異,而45、6ABA含量都有所增加,1、23組水稻細(xì)胞內(nèi)均有NCED3,分析其原因可能是正常灌溉下NCED3基因幾乎不表達(dá),因此三組的ABA幾乎無(wú)明顯差異性。

③分析圖2可知,干旱脅迫下,4、5、6組中ABA含量均有增加,特別是第5組轉(zhuǎn)基因水稻幼苗ⅠABA增加最多,第6組轉(zhuǎn)基因水稻幼苗Ⅱ增加最少,且低于第4組ABA含量,第6組植株是反向連接構(gòu)建表達(dá)載體(轉(zhuǎn)錄NCED3基因的非模板鏈),獲得轉(zhuǎn)基因水稻幼苗Ⅱ,可能反向連接載體的導(dǎo)入干擾了NCED3基因的表達(dá)(翻譯),使得NCED3的合成減少所致。

(4)根據(jù)題意,該實(shí)驗(yàn)的目的是推測(cè)NGA1蛋白是干旱環(huán)境促進(jìn)NCED3基因表達(dá)的調(diào)控因子。該實(shí)驗(yàn)的自變量是NGA1基因的有無(wú),因此通過(guò)檢測(cè)野生型植株(對(duì)照組)和NGA1基因敲除突變體植株(實(shí)驗(yàn)組)的NCED3基因表達(dá)量,如果結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組,則初步支持上述推測(cè);若要進(jìn)一步驗(yàn)證推測(cè),應(yīng)繼續(xù)選擇NGA1基因敲除突變體植株為實(shí)驗(yàn)材料,為其導(dǎo)入含NGA1基因的表達(dá)載體,使其細(xì)胞內(nèi)含有了NGA1基因,然后將該植株放在模擬的干旱條件下實(shí)驗(yàn),若推測(cè)成立,則NGA1基因表達(dá)的NGA1蛋白促進(jìn)NCED3基因的表達(dá),那么檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)NCED3-mRNA含量,則 NCED3-mRNA含量高于對(duì)照組。

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