Question

【題目】人絨毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于檢測早孕。圖甲是抗HCG單克隆抗體的制備流程示意圖，其中X、Y表示細胞，a～f表示操作過程。圖乙是醫(yī)學(xué)上定量檢測抗原的雙抗體夾心法原理示意圖，需先將抗體固定并與受檢抗原結(jié)合形成復(fù)合物，再加酶標抗體和底物，加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢抗原的量直接相關(guān)，根據(jù)顏色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，從而使測定方法達到很高的敏感度。回答下列問題。

（1）a過程中培養(yǎng)的Y細胞是____________，b過程中常用____________，____________，____________等方法誘導(dǎo)細胞融合，d所示操作的目的是____________。

（2）e過程培養(yǎng)的細胞，首先應(yīng)保證其處于________________的環(huán)境，其次還需要提供充足的營養(yǎng)等條件，其中加動物血清的目的是____________。

（3）用雙抗體夾心法檢測抗原數(shù)量，酶標抗體的作用是____________和____________。若現(xiàn)有三種抗HCG單克隆抗體，分別記為A、B、C。為檢測它們之中哪兩種適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進行____________組實驗，檢測并比較各組實驗的產(chǎn)物量，以便得出結(jié)論。

Answer 1

【答案】骨髓瘤細胞 滅活的病毒 聚乙二醇 電激 獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細胞 無菌、無毒 補充配制的培養(yǎng)基中缺乏的營養(yǎng)成分及一些激素等促進細胞生長的物質(zhì) 與待測抗原結(jié)合 催化檢測底物反應(yīng) 6

【解析】

1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。
2、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”。

（1）根據(jù)圖示可知，從小鼠體內(nèi)提取的X為經(jīng)過免疫的漿細胞，則Y為骨髓瘤細胞，誘導(dǎo)二者融合形成雜交瘤細胞常用滅活的病毒、聚乙二醇、電激等方法。融合后的細胞需要經(jīng)過c過程的初次篩選和d過程的抗體檢測和克隆化培養(yǎng)，故d所示操作的目的是獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細胞。

（2）e過程為體外培養(yǎng)動物細胞，首先應(yīng)保證其處于無菌、無毒的環(huán)境，其次還需要提供充足的營養(yǎng)等條件，其中加動物血清的目的是補充配制的培養(yǎng)基中缺乏的營養(yǎng)成分及一些激素等促進細胞生長的物質(zhì)。

（3）酶標抗體的作用是與待測抗原結(jié)合；酶能催化檢測底物反應(yīng)，可通過測定酶反應(yīng)的產(chǎn)物量來判斷待測抗原量。研究人員獲得三種抗HCG單克隆抗體，分別記為A、B、C，為檢測它們之中哪兩種適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進行6組實驗，分別是AA、BB、CC、AB、AC、BC，檢測并比較各組實驗的產(chǎn)物量。