Question

【題目】【生物——選修3：現代生物科技專題】

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關。獲得轉KIFⅡ基因的高絨質山羊的簡單流程如下圖所示：

（1）在①過程中構建的KIFⅡ基因表達載體時，最常用的運載工具是__________；構建成功的基因表達載體上，目的基因應插入__________和__________之間，以便成功表達。

（2）從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因可用______技術進行擴增，其原理是______________。

（3）通過②過程形成的成纖維細胞在培養過程中，將其置于含95%空氣加__________的混合氣體培養箱中培養，培養中加入__________達到無菌環境。

（4）通過④過程獲得的卵（母）細胞，在與成纖維細胞形成重組細胞前，應先通過顯微操作去掉__________。

Answer 1

【答案】 質粒 啟動子 終止子 PCR DNA雙鏈復制 5%CO2 抗生素 細胞核

【解析】試題分析：①圖中為構建基因表達載體，②為用胰蛋白酶處理動物組織使其分散成單個細胞，③為獲取成熟的去核卵母細胞，之后通過把含目的基因的受體細胞的細胞核移入去核的卵母細胞獲得重組細胞，再經過早期胚胎的培育至桑葚胚或囊胚，通過胚胎移植到代孕母羊的子宮內，繼續發育，直至分娩出轉基因絨三羊。

（1）基因工程中，運載工具包括質粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質粒是最常用的運載工具。目的基因要能成功表達，上游必需有啟動子，下游必需有終止子，所以構建基因表達載體時，應將目的基因插在啟動子和終止子之間。

（2）擴增從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因，可用PCR技術進行，其原理是 DNA雙鏈復制。

（3）在動物細胞培養過程中，為維持培養液的PH值，往往加入5% CO2。培養中為了抑制雜菌的污染，常常應加入一定量的抗生素。

（4）成熟卵(母)細胞在核移植前需要進行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核。