Question

【題目】神經纖毛蛋白-1（NRP-1）是血管內皮生長因子的新型受體，經實驗證明，與正常組織細胞相比，NRP-1在乳腺癌（MCF7）細胞中高表達，通過參與多種信號轉導來促進腫瘤血管的生成，進而促進腫瘤體積的增長。本研究將為 NRP-1 單克隆抗體靶向治療乳腺癌提供數據基礎。

（1）取乳腺癌（MCF7）組織塊，運用____________________技術獲得 MCF7 細胞用于后續實驗。用人的_____________________蛋白對小鼠進行注射，使小鼠產生免疫反應，制備雜交瘤細胞，將雜交瘤細胞轉到多孔培養板上培養，吸取培養孔中的________________（填上清液或沉淀細胞），應用_________________技術進行抗體陽性檢測。經多次篩選和細胞培養，獲得 NRP-1 單克隆抗體（NRP-1 MAb）。

（2）將 MCF7 細胞制成單細胞懸液，等量注入 4 組裸鼠（即無胸腺裸鼠）右前腋下，接種后 3 天開始給藥NRP-1 單克隆抗體（NRP-1 MAb），共給藥 7 次，對照組注射等量的生理鹽水。每隔 5 天測算一次腫瘤的體積，如下圖所示：

從上圖中可以看出_________________________

（3）結合題干信息，綜合以上研究請你推測 NRP-1 MAb 抑制腫瘤的作用機理是_____________________。

（4）注射不同劑量 NRP-1 MAb 33 天后，剝離腫瘤組織稱重，實驗結果如下圖：

從該結果中可以看出___________________________。綜合比較（3）和（5）的實驗結果，可見中高劑量和低劑量的 NRP-1 MAb 在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現了不一致性。通過實驗研究，有助于指導實踐中科學用藥。

Answer 1

【答案】動物細胞培養 神經纖毛蛋白-1（NRP-1） 上清液 抗原—抗體雜交 NRP-1 MAb能夠有效地降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著 NRP-1在MCF7細胞中高表達，NRP-1 MAb與NRP-1特異性結合，阻斷了血管內皮生長因子與NRP-1的結合，抑制了腫瘤血管生成，進而降低了腫瘤的體積 NRP-1 MAb能夠有效地降低腫瘤組織的重量，中、高劑量抗體的降低效果稍微沒有低濃度的好，不同劑量降低效果的差異并不顯著

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體。

（1）取乳腺癌組織塊，通過動物細胞培養技術獲得MCF7細胞用于后續實驗；用人的神經纖毛蛋白對小鼠進行注射使小鼠產生免疫反應；抗體較輕，會留在上清液中，故要吸取培養孔中的上清液；應用抗原-抗體雜交技術進行抗體陽性檢測；

（2）根據題圖分析可知，經過給藥NRP-1 MAb處理的腫瘤體積均小于對照組，說明NRP-1 MAb能夠有效地降低腫瘤組織的重量且中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著；

（3）已知NRP-1在乳腺癌（MCF7）細胞中高表達，通過參與多種信號轉導來促進腫瘤血管的生成，進而促進腫瘤體積的增長，而NRP-1 單克隆抗體則可以和NRP-1特異性結合，故阻斷了血管內皮生長因子與NRP-1的結合，抑制了腫瘤血管生成，進而降低了腫瘤的體積；

（4）分析題圖可知，比較實驗組與對照組的腫瘤組織重量NRP-1 MAb能夠有效地降低腫瘤組織的重量，但中、高劑量抗體的降低效果稍微沒有低濃度的好，不同劑量降低效果的差異并不顯著。